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什么是ATP荧光检测?
2017-04-04 10:23:53 来源:什么是ATP荧光检测?
ATP检测是用于食品饮料等生产企业和卫生监督部门的一种快速检测方法,主要用于表面洁净度或CIP流程中液体样品清洁效果的评估判断。三磷酸腺苷(ATP)存在于所有有机物中,是所有活细胞中能量来源的供体。ATP产生于所有生命系统的代谢过程中,因此大多数食物和微生物细胞中都含有一定水平的ATP。Hygiena(海净纳)ATP荧光仪(配套ATP检测拭子)采用生物发光技术检测残留的ATP并以此作为表面清洁度的一个指标。若表面检出较高含量的ATP说明清洁不当,有包括食品残留、过敏原和/或细菌等污染物存在。这意味着该表面有潜在滋生细菌的可能。食品饮料业使用ATP检测是为了确认通过有效的卫生清洁处理是否消除或*大限度减少了ATP的存在。ATP检测不仅能有效防止交叉污染、确保产品的完好,还可能提高产品保质期和保护品牌荣誉;同时也符合GMP标准和HACCP(危害分析和关键环节控制点)要求。
ATP检测如何运行?
Hygiena ATP检测系统含有一种天然的荧光素酶,当这种酶与ATP接触时可产生一种生物发光反应。采用这种生物发光技术,SystemSURE Plus和EnSURE荧光仪可以检测到拭子采集的极低水平的ATP含量。ATP反应中检测到的生物发光量能够很好地指示表面清洁度或水质状况,因为反应产生的光量能直接反映出样品中ATP的含量(正比关系)。生物发光反应是瞬间发生的,所以检测结果数秒可得。检测结果在荧光仪显示屏上以相对光单位(RLU)表示。
生物发光是生物化学反应的结果,也是Hygiena ATP检测系统的科学依据。反应包含以下要素:
荧光素/荧光素酶——萤火虫中天然生成
三磷酸腺苷(ATP)——所有生物体的能量分子
氧——催化剂
荧光素/荧光素酶 + ATP + O2 == 发光
反应分两步:
1) 1. 底物与ATP与氧结合,被酶催化。
2) 2. 步骤1中的化学能量将激发特定的分子(荧光素与荧光素酶的结合物),衰变后产生光子。光是该化学反应的副产品。
什么是RLU?
RLU是英文相对光单位的缩写,是生物发光的测量单位。荧光仪采用RLU输出值对光进行检测和定量。不同品牌的ATP荧光仪采用不同的传感技术和运算法则来合计光子量,所以RLU的数值也因品牌不同而不同。然而,由于ATP生物发光反应是线性的,因而ATP含量越高,光产生的也越多(RLU值越高)。(不同品牌RLU数值的对比就像是比较华氏温度和摄氏温度,即它们是相同温度的两种不同刻度。)更多相关资料请访问www.hygiena.com 的Hygiena资源中心。
有多少食品饮料加工企业正在使用ATP检测?
欧美90%涉及到水的食品饮料企业都在采用ATP检测。而那些生产加工油脂类或谷物类等含水分较少的产品的企业则较少使用ATP检测。ATP检测在全球的应用主要被作为评价检验清洁过程的工具,符合政府和HACCP的规定。
所有食品含有ATP吗?
由于ATP存在于所有的有机物中,因此所有食品都不同程度的含有ATP。这就是为什么检测ATP的含量是检测表面和水样清洁度的较好办法。深度加工的产品如油类则仅有少量甚至没有ATP。
对于ATP检测有研究报告或白皮书出版吗?
有关食品饮料加工业的ATP检测已经有几种出版物,可访问www.hygiena.com 的资源库寻求链接或查找这些研究报告的全文。制造商也会提供类似的科学研究来支持各自的ATP系统。对客户而言*重要的是,只接受第三方权威实验室出具的客观研究报告来作为评价不同产品性能的科学依据。全球*大的第三方实验室Silliker(实力可)实验室是国际领先的食品检测与安全实验室,该实验室已经对5个商业化的ATP系统进行了独立的研究。Silliker研究报告显示Hygiena的产品提供了*佳线性、灵敏度、重复性和准确性。如需获取更多资料或报告的完整版请联系Hygiena或代理商。
用户的合格和不合格限值应为多少?
所有ATP系统的限值是预设定和通用的,适用于大多数的生产加工企业和监管部门。这些限值设立的依据来自于多年来做ATP检测的企业,并有相关科学研究报告的支持。对于*次做ATP检测的企业来说这些限值是很好的开端。关于这些RLU限值是如何确定的或者用户的合格/不合格限值的设定步骤,请联系Hygiena或代理商。
不同检测位置可以有不同的限值吗?
是的。合格/不合格限值完全按照客户设施的需要定制。对于特殊位置的限值,可通过在SureTrend软件上可编辑设备设置数据来调整。
RLU计数能与CFU平板计数比较吗?
ATP系统检测的是ATP的含量,它不能将清洁后剩下的微生物ATP和有机物ATP区分开。RLU结果可能来自微生物细胞内的ATP、产品残渣中的有机物ATP,或两者都有。这就使得RLU和CFU对比存在一定的困难。研究表明,根据系统使用的环境不同,RLU和CFU读数间有60-90%的关联性。若表面存在ATP说明清洁不够充分。清洁的主要目的是为了清除产品接触面上的残留物。有效的清洁是指不仅能清除支持微生物存活或生长的材料,也能同时清除微生物本身。ATP系统的相关技术过去几年已经取得了快速发展,目前Hygiena的ATP系统不仅可检测ATP,也可对不同微生物进行特定的检测。如需获取多功能ATP系统的更多资料,请联系Hygiena 或代理商。
什么是生物膜?
生物膜的形成源自微生物找到了能够接触到食物和水分的合适环境。各种微生物集中在一起并分泌出粘性聚合物形成固体基质,附着于表面后形成生物膜。生物膜一旦形成后非常难以消除,因为细菌会被基质强化和保护起来,对杀菌剂的抵抗极强。生物膜的存在常常是导致产品质量降低和/或产品损失的原因。采用恰当的ATP卫生检测可早期发现和及时清除食品残留物,从而消除可能形成生物菌的细菌。此外,Hygiena的ATP拭子头上具有独特的去垢剂,可穿透生物膜来检出膜下面的细菌。若生物膜已形成,那么表面将有更多的ATP存在,从而导致更高的RLU结果。
应该何时做ATP检测?
ATP检测应在清洁后、但在使用消毒杀菌剂之前进行。当表面有产品残留物时会降低消毒杀菌剂的效果,所以在进行消毒杀菌前*好先清除所有的ATP。如果某些设备不能在清洁之后做检测,则可在消毒杀菌后进行检测。
在拭子涂抹前必须干燥表面吗?
用拭子检测不必干燥表面。但是为了保持检测读数的一致性,应在相同条件下涂抹表面(总是干燥的或总是潮湿的)。为了在干燥表面上*大程度采集样品,Hygiena的拭子已经做了预湿。
消毒杀菌剂或肥皂会干扰拭子计数吗?
食品饮料行业通常使用的消毒杀菌剂按正常使用浓度一般不会对Hygiena拭子的性能造成显著的影响。但使用超过制造商推荐浓度的酸性杀菌剂时会对拭子性能造成影响。
应检测什么区域?
涂抹主要针对食品接触区域(直接的或间接的)和难以清洁的区域。直接接触区域是指任何污染物的存在都会影响到终产品的表面。间接接触区域是指可能有飞溅物、灰尘或液体滴到、排放到或转移到产品上的地方。难以清洁区域包含填料头、O形环、喷嘴、不规则表面、拐角、凹槽和裂缝等。
关键检测区和常规检测区应多久用拭子涂抹一次?
关键检测区(高风险的)应每天检测,在每次清洁后或生产前的任何时间进行。若检测到不合格结果,应立即采取改正措施,重新清洁并重新检测直到检测结果合格为止。常规检测点(低风险的)不必频繁检测。
什么是正确的涂抹方法?
涂抹区域应大约为4x4平方英寸(10x10厘米),而难以清洁的区域应尽可能多的涂抹表面部分。拭子不得接触检测区域以外的任何东西以避免污染。涂抹时应适当向拭子施压以便更好地采集表面残留物和穿透可能存在的生物膜。采集样品后,将拭子放回拭子管中。拭子在不激活状态下*多可以放置4小时,一旦激活需在60秒内读数。
正确方法
不正确方法
l 不要接触拭子杆
l 足够的压力使拭子棒弯曲
l 旋转拭子让拭子头的各个面都采集到样品
l 涂抹10x10厘米的区域
l 手指碰到了拭子杆
l 很轻地将拭子接触到样品区域
l 拭子头仅有一面采集了样品
l 没有涂抹足够的表面
温度是如何影响ATP检测结果的?
20-22℃(70-72℉)的环境温度提供了*佳检测性能。试剂在低温状况下会影响结果,这种情况通常发生在刚从冰箱取出检测试剂时。如果是在低温环境下做检测,Hygiena仪器会自动调整适应外部温度,但是荧光素酶试剂需要在20-22℃(大约70℉)的温度时性能才能达到*佳。如果试剂在较低的温度下进行检测时生物发光反应将变慢,其RLU检测结果也将低于正常结果。如果仪器已达到环境条件,温度则不会影响到对光的检测。仪器会感应到环境温度5℃的变化并自动启动重新校准程序。用户也可在任何时间人工启动重新校准程序,只要按住OK键3秒钟即可。如果仪器在使用前与环境保持10-15分钟的平衡并且拭子保持较高的温度(如20-22℃),则系统可在低温(如5℃)环境使用。
日光直接照射会影响检测结果吗?
是的。在日光直接照射下进行的检测将扭曲结果,引起RLU值增加。如果检测采集必须在室外进行,那么拭子的使用应远离日光的直接照射。
ATP检测的有效期是多久?
Hygiena的ATP检测拭子在冷藏温度(2-8℃)下15个月有效,在室温(21-25℃)下4个星期有效。为便于使用,用户可参考拭子标签上的有效期。
系统需要校准吗?
Hygiena的ATP系统在启动时会自动校准来确保正确的读数。为了进一步验证校准,我们可提供校准控制盒(编号:PCD 4000)。虽然这种校准控制盒对系统的性能不是必需,但是有记录的校准过程可用以向审计人员展示。Hygiena先进的技术可以使系统设备寿命期内保持自我校准。
我要担心维护成本吗?
与市场上的其他系统不同,Hygiena的EnSURE和SystemSURE Plus仪器不需要每年进行维护服务。检测系统有1年的保修期。若用户的系统损坏或不能运行,Hygiena将及时用备用机替换,以保证用户的检测程序不会被中断。
除了ATP检测,系统还有其它用途吗?
除了表面和水样ATP检测,Hygiena的EnSURE仪器还可以检测大肠菌群、大肠埃希菌、细菌总数、肠杆菌、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和过敏原预防(蛋白残留)等。
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