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    仪器在食品、农业上如何应用?

    2012-11-30 15:46:44  来源:
    食品安全监督行业
     ATP荧光检测仪
    ATP荧光检测仪在1975年首先被应用到食品工业中, 主要是通过荧光素酶与微生物中ATP进行反应,快速的检测活体细胞、细菌、霉菌、食物残渣等,在15秒钟内得到反应结果,并以数字形式予以表示, ATP荧光检测仪主要用于表面清洁度、环境卫生状况的实时监测以及水质的检测(微生物等)。
    在食品安全监测方面,它具有常规检测无法比拟的优势。ATP荧光检测仪无论是“时效性”或实际效果都大大优于通过目测或细菌平皿计数的效果。因此,有观点认为,可以用ATP的总量作为判断食品合格状况是否良好的一个标准。
    ATP荧光检测仪优点:
    1
    .快速、准确。常规平皿计数法检测细菌总数,是让细菌在LB培养基上培养成肉眼可见的细菌菌落。由于样品稀释不均等原因,一个菌落往往由两个或多个细菌细胞构成,而且LB培养基只适合需氧或半需氧细菌的生长。因此,只能得到此类细菌的数量。采用ATP荧光快检法可检测到所有细菌、真菌和藻类,且15S即可得到实时检测结果,操作简单,时间短。平皿计数法则需要1-5天,所得结果难以反映实际状况,ATP荧光检测仪检测的实时结果以RLU(相对发光单位)的形式输出,和传统的培养法得出的菌落总数呈严格的线性相关,结果准确、可靠。
    2、实时、快速检测食品生产过程中细菌污染程度。可快速的对食品生产过程中涉及到的原料、加工设备、厂区环境等进行快速实时的检测。如:生产加工过程中涉及到的加工台、设备元器件、操作工人的手、直接接触食品的设备进行快速的、实时的进行检测,实现对加工过程的控制,防止出现污染。
    实时荧光定量PCR:
    1. 致病菌的检测: 食品中常见的各种常见致病菌的检测,如:坂岐肠杆菌、志贺、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的检测、副溶血性弧菌、霍乱弧菌等致病菌的检测。常规方法检验程序复杂,易出现生化反应交叉,实时荧光定量PCR技术提供了一种新的、快捷、准确的方法。

    1. 食品转基因的检测:传统的对外源基因表达产物的检测如ELISA、Western blot等,这些方法大多基于免疫反应高度特异性。转基因食品的潜在问题包括:转基因食品的过敏性、转基因食品的毒性、营养品质改变问题,环境安全性以及存在的伦理道德问题。在众多的检测方法中,实时荧光定量PCR技术可以筛选转基因特异DNA片段,具有较高的检测准确性和灵敏性。目前国家已经建立了转基因大豆和转基因玉米的实时荧光定量检测的方法,初步实现了转基因食品的定量分析和品种鉴定。目前此项技术已经被一些国家作为控制食品安全问题的标准检测方法,使转基因食品的检测更上了一个台阶。
    2. 食品微生物研究:主要是微生物生理代谢、菌群分布、菌株鉴定。
    利用实时荧光定量PCR技术可对食品微生物代谢功能基因进行定量研究,从而了解其代谢途径。目前,该技术已成为食品微生物研究中不可缺少的研究工具。如在食品发酵过程中绝大多数活菌都不能体外培养,难以估计产物中的细菌种类和数量,利用该技术可不经培养直接分析发酵产物中的微生物种群。

    农业方面:
    实时荧光定量PCR:
    1. 在植物转基因表达的检测中的应用。
    实时荧光定量PCR主要用于植物方面对于一些感兴趣目的基因在通过转基因操作后,对目的基因在转录、表达水平的检测,实时荧光定量PCR能够实时、定量的对不同阶段目的基因的表达情况进行定量分析。
    总之,随着转基因植物研究飞速发展,其安全性也常引起广泛的关注和争议,为了控制其可能存在的危险,国际上普遍实行转基因标识制度。标识制度的实行就是要求人们准确、稳定的检测样品中转基因物质的百分含量,实时荧光定量PCR技术为转基因的定量检测提供了良好的技术手段。

    1. 在动物研究中疾病诊断、基因定位分析的应用
    实时荧光定量PCR技术在动物疾病的诊断方面主要是发现、定位一些与疾病相关的基因,通过基因的差异表达在分子水平研究发病机理,为动物疾病的治疗、预防打下基础。
    1. 在植物研究中功能性基因的检测。
    实时荧光定量PCR技术因其实时、快速、高效和准确定量的优点,已经广泛用于转基因植物功能基因表达的定量检测。通过对目的基因表达的定量研究,从基因水平研究蛋白质功能,蛋白质结构。
    1. 生物多样性的检测。
    2. 植物病虫害诊断、防治中的应用。
    1990年BOHM等首次将实时荧光定量PCR应用于植物病害中真菌的检测。传统方法对植物病原菌的检测主要是采用生物学和血清学的方法,费时费力。实时荧光定量PCR技术应用于植物病原菌的检测之后,不仅有效的提高了检测速度和水平,而且检测的灵敏度也比一般的检测方法高出100倍,另外一个*大的优势就是实验中不需要PCR的后续处理和病原菌的分离培养。
    1. 在昆虫学上的的应用。
    实时荧光定量PCR技术在昆虫学上的应用主要在昆虫基础生物学研究中的应用、昆虫分类和鉴定、昆虫检疫、昆虫种群生态学研究、昆虫病原微生物学等方面的研究中有主要的意义。
    1. 在植物病原检测方面的应用。
    实时荧光定量PCR技术以其快速、灵敏、准确和高通量等特点受到了人们越来越多的重视,被广泛的应用于植物病原检测方面,已建立了一大批植物病原的实时荧光定量PCR方法,这为植物病害的准确诊断与防控提供了强有力的工具。
    1. 饲料行业的应用。
    饲料中鱼源性成分检测的实时荧光PCR方法该方法能对饲料中鱼源性成分进行准确、快速的检测,具有特异性好、灵敏度高的优点,对防止饲料掺假、控制进出口饲料安全具有重要意义。
    核酸提取仪:
    1. 将多种来源(包括土壤,植物和动物的组织/器官,细菌,酵母,真菌,孢子等)的DNA,RNA进行提取和纯化。
    2. 植物功能基因表达中核酸的提取。
    研究植物中功能基因在不多品种、不同发育阶段的植物中的表达情况,需要进行核酸的大量分离、纯化工作,传统的方法主要是以酚/氯仿为主的化学试剂提取方法,耗时耗力,对实验工作人员的身体易造成一定的伤害,核酸提取仪利用磁珠法的原理实现核酸提取的机械化,避免了化学试剂的使用,节省了时间,提取的核酸浓度、纯度也大大的提高。
    1. 建立基因文库。

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